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铁线莲属萼片荧光定量PCR内参基因的筛选和评价取得阶段性进展

以不同花色的铁线莲属(Clematis)栽培品种‘恬美’(C. ‘Sympatia’)、‘罗兰’(C. ‘Rooran’)、‘仙女座’(C. ‘Andromeda’)、‘阿拉贝拉’(C. ‘Arabella’)、‘普鲁吐斯’(C. ‘Proteus’) 以及‘路易斯罗维’(C. ‘Louise Rowe’)初花时期的萼片为研究材料,利用qRT-PCR技术检测AtpbArp7Ubc34Wit1Cxip4Cyp71a1Cyp35a1等7个候选内参基因的mRNA表达情况,并利用软件geNorm、NormFinder、BestKeeper和RefFinder对候选内参基因的稳定性进行综合评估。结果表明,内参基因表达差异显著;利用geNorm软件计算结果为基因AtpbCxip4最稳定; 利用NormFinder软件计算结果为基因Cxip4最稳定;而BestKeeper软件计算出的最稳定的候选内参基因为Arp7,其次为Atpb;按这三个软件的计算结果,Cyp71a1Cyp35a1的稳定性均最差,不适合作为内参基因;RefFinder软件分析的最佳的候选内参基因为Arp7。经综合分析,这几个铁线莲品种萼片基因表达的适宜内参基因是Arp7Atpb

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